一、簡(jiǎn)介
辣根過(guò)氧化物酶，英文名Horseradish peroxidase，簡(jiǎn)稱HRP，酶學(xué)編號(hào)EC1.11.1.7；是來(lái)源于辣根的一組具有一定酶活活性的同工酶，其中辣根過(guò)氧化物酶同工酶C（HRP C）含量最高，在辣根的根部含量最為豐富。
二、結(jié)構(gòu)
辣根過(guò)氧化物酶主要由糖蛋白（酶蛋白）和鐵(III)原卟啉IX（輔基）組成。糖蛋白中糖含量一般是18~22%。由于辣根過(guò)氧化物酶的酶蛋白和輔基分別在紫外波長(zhǎng)275nm和403nm下有最大吸收峰，分離得到的HRP都有一個(gè)OD403nm/OD275nm的比值RZ（德文Reinheit Zahl）。RZ值的大小表示了酶的純度，純度較高的HRP的RZ值一般在3.0以上，RZ值越小，酶純度越低。源葉生物根據(jù)RZ值的不同，分別有以下幾款對(duì)應(yīng)的產(chǎn)品：
貨號(hào)S10062 過(guò)氧化物酶（辣根） RZ＞3，酶活≥300u/mg；
貨號(hào)S10063 過(guò)氧化物酶（辣根） RZ＞2.5，酶活≥250u/mg；
貨號(hào)S10064 過(guò)氧化物酶（辣根） RZ＞1.5，酶活≥150u/mg；
HRP是一組同工酶，由于HRP C含量最高，對(duì)HRP C結(jié)構(gòu)研究的也最為詳細(xì)。HRP C是一組單亞基糖蛋白，包含308個(gè)氨基酸殘基和8個(gè)糖鏈，每分子HRP C中有2分子Ca 2+ 、1分子鐵(III)原卟啉IX輔基和4對(duì)二硫鍵，相對(duì)分子質(zhì)量約為44 000。辣根過(guò)氧化物酶的作用機(jī)制，酶學(xué)特性，等電點(diǎn)等都與其結(jié)構(gòu)息息相關(guān)。
三、酶的作用機(jī)制和酶學(xué)特性
HRP可以催化底物過(guò)氧化氫（H2O2）和供氫體（DH2）生成自由基和水，
供氫體有很多，如芳香族化合物，酚類，吲哚，胺類和磺酸鹽類等。在實(shí)際應(yīng)用中，供氫體DH2多選擇溶液為無(wú)色的物質(zhì)，通過(guò)反應(yīng)生成有色物質(zhì).D，從而通過(guò)對(duì)反應(yīng)后溶液顏色深淺的測(cè)定，來(lái)得到需要的數(shù)值。常用的供氫體DH2有TMB（源葉貨號(hào)：S19126），ABTS（源葉貨號(hào)：S19198）和焦性沒(méi)食子酸（源葉貨號(hào)：S30154）。
由于供氫體多種多樣，針對(duì)不同的供氫體，HRP反應(yīng)的最適pH都不太一樣，但多數(shù)是在5.0左右，反應(yīng)的溫度一般就是常溫25℃左右。
三、應(yīng)用
由于HRP性質(zhì)穩(wěn)定，天然來(lái)源豐富，且分子量小，容易制得活性較高的純酶，所以應(yīng)用較為廣泛。
1. HRP是目前在ELISA中應(yīng)用最為廣泛的標(biāo)記用酶之一，主要是因?yàn)槠淙菀字频?，價(jià)格相對(duì)較低，且性質(zhì)穩(wěn)定，耐熱和有機(jī)溶劑，與抗原或抗體偶聯(lián)后，活性損失很小。
2. HRP也常用與污水處理。工業(yè)廢水中含有大量的苯酚，雙酚A等分類和芳香胺類化合物，等環(huán)境污染較大，HRP可以將這些污染物作為底物，氧化成自由基，自由基在聚集成沉淀聚合物，從而大大降低對(duì)環(huán)境的污染。
3. HRP近幾年來(lái)被研究用作食品添加劑。由于HRP本身無(wú)毒無(wú)害，反應(yīng)條件溫度，反應(yīng)易控制，近年來(lái)被研究用于食品的保鮮，解毒和檢測(cè)等領(lǐng)域。
4. 檢測(cè)領(lǐng)域：HRP可以與葡萄糖氧化酶（源葉貨號(hào)S10020）聯(lián)用，用以檢測(cè)葡萄糖含量。
